細胞計數板是一塊特制的厚型載玻片,載玻片上有四個(gè)槽構成三個(gè)平臺。中間的平臺較寬,其中間又被一短橫槽分隔成兩半,每個(gè)半邊上面各刻有一小方格網(wǎng),每個(gè)方格網(wǎng)共分九個(gè)大格,中央的一大格作為計數用,稱(chēng)為計數區。計數區的刻度有兩種:一種是計數區分為16個(gè)大方格(大方格用三線(xiàn)隔開(kāi)),而每個(gè)大方格又分成25個(gè)小方格;另一種是一個(gè)計數區分成25個(gè)大方格(大方格之間用雙線(xiàn)分開(kāi)),而每個(gè)大方格又分成16個(gè)小方格。但是不管計數區是哪一種構造,它們都有一個(gè)共同特點(diǎn),即計數區都由400個(gè)小方格組成。
細胞計數板的使用方法:
實(shí)驗原理:當待測細胞懸液中細胞均勻分布時(shí),通過(guò)測定一定體積懸液中的細胞的數目,即可換算出每毫升細胞懸液中細胞的細胞數目。
細胞計數板的具體操作:
1.將計數板及蓋片擦拭干凈,并將蓋片蓋在計數板。
2.將細胞懸液吸出少許,滴加在蓋片邊緣,使懸液充滿(mǎn)蓋片和計數板之間,靜置3min,注意蓋片下不要有氣泡,也不能讓?xiě)乙毫魅肱赃叢壑小?br />
3.計算板四大格細胞總數,壓線(xiàn)細胞只計左側和上方的。然后按公式計算:細胞數/mL=四大格細胞總數/4×104
說(shuō)明:公式中除以4,因為計數了4個(gè)大格的細胞數。公式中乘以104因為計數板中每一個(gè)大格的體積為:
1.0mm(長(cháng))×1.0mm(寬)×0.1mm(高)=0.1mm3而1ml=1000mm3
(注意:鏡下偶見(jiàn)有兩個(gè)以上細胞組成的細胞團,應按單個(gè)細胞計算,若細胞團10%以上,說(shuō)明分散不好,需重新制備細胞懸液)